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| 高營養水平可能降低胚胎成活率？ |
| 2023-09-11 11:50:42 |
母豬胚胎存活率受日糧營養水平的影響，部分研究發現高營養水平降低了胚胎成活率，也有相反研究結果報道。胚胎成活率的降低對生產母豬產仔數來說是不利的，而高產母豬并不受影響。相反高胚胎成活率增加了胎兒發育遲緩、平均初生重下降的風險。而且，胚胎的存活率越高，胚胎發育的變異系數越大。
因為子宮著床階段胚胎死亡率的波動有利于胚胎變異系數的降低(Pope等,1986)。因此，在著床前高產母豬胚胎存活率下降的同時，降低了胚胎早期的變異系數和子宮擁擠，有利于改善仔豬出生性能。本實驗旨在研究妊娠第1周高營養水平飼糧對高產母豬胚胎存活率和均勻度的影響。母豬受精后營養和孕酮水平對胚胎的影響已有報道(Den Hartog和van Kempen,1980;Dyck and Strain,1983；Ashworth,1991;Jindal等,1996)。盡管高排卵率對經產老母豬來說容易造成子宮擁擠，但排卵數高達20個甚至以上時，也會限制高產母豬胎盤發育，造成子宮擁擠(Almeida等,2000)。  1、材料與方法 1.1實驗動物 30頭在產仔數方面經過10代以上品種選育的大白高產母豬(INRA herdNouzilly,France)，比一般大白母豬至少多產3頭仔豬，黃體數多4個以上。每6頭一圈，自然光照，漏縫地板。母豬第1次或第2次發情后（連續18 d）口服烯丙孕素，然后每天2次趕公豬檢查母豬的發情跡象(早上9點和下午4點各1次)。發情的第1天定為第0天，人工授精2次，每次每圈使用同一頭皮特蘭新鮮稀釋精液。早上第1次出現站立不動發情現象，8 h后進行第1次人工授精，24 h后進行第2次。當第1次發情是在下午檢測到，16h后進行第1次人工授精，第2次8 h后。授精時發情母豬的平均日齡為(227±1)d，活重(133±2)kg。 1.2飼養管理 第1次人工授精后，母豬標準日采食量2 kg，預飼1 d(營養水平：12.5MJ/kg,13.5%CP和0.5%Lys)。然后隨機分成2組，一組為高營養水平組，日采食量4 kg，升為原來的2倍(n=15)；另一組為對照組，采食量維持不變(n=15)，持續7 d。個別收集剩料，最后集中一起脫水稱重，計算平均日采食量。7 d后，所有母豬重新回到日采食量2 kg水平。 1.3屠宰測定 妊娠的第26，27和28天在當地屠宰場進行屠宰，因為這一時期母豬剛剛進入著床期(Johnson等,2009)，子宮方面還不是胚胎存活率的限制因素(Fenton等,1970)。因此，只有營養因素(排除了潛在的子宮擁擠因素)對高產母豬排卵率有影響。屠宰后立即收集生殖道，稱重雙側卵巢，黃體計數稱重；分離子宮角和闊韌帶，測量子宮長度；從一側卵巢縱切，收集胚胎。每個胚泡由胚膜包著胚液，精心與子宮內膜分離，然后從胚泡中分離出胚胎，稱重，用卡尺測量胚胎長度。最后，計數活胚胎數，死胚胎數(尿囊和羊膜中有黑色液體)，以及被吸收胚胎數（胚胎和液體消失）。 1.4數據統計分析 胚胎存活率的計數標準：活胚胎數/黃體數； 著床后胚胎存活率：活胚胎數/總胚胎數； 每窩胚胎重量和長度的平均值和變異系數； 子宮密度：活胚胎數/子宮角長度(m)； 每個活胚胎數或黃體可利用空間：子宮角長度(cm)/活胚胎數。 妊娠27 d之前（不管是著床之前，期間和之后）的胚胎存活率與受精率有關，而著床后的胚胎存活率專指附著胎盤的胚胎存活率（大約18－27 d之間）。妊娠27 d基本可以確定宮內發育遲緩(子宮內生長阻滯)，統計弱胚胎數，即活胚胎重低于每窩平均值減去兩個標準差的重量。全部數據采用SAS(SAS Inst.Inc.,Cary,NC)進行方差分析，模型包括組內和組間效應，某些參數引入黃體數或妊娠年齡的分析變項，P<0.05差異顯著，結果顯示為平均值±標準誤。 2、結果分析 2.1飼糧營養水平對胚胎存活率和發育的影響 高營養水平組2頭母豬出現剩料現象，7 d的平均日采食量分別為3.8 kg和3.9 kg，因此屠宰了28頭母豬(高營養水平組13頭，對照組15頭)。從表1可以看出，兩組的母豬妊娠率沒有差異性（P>0.1），妊娠27 d兩組母豬繁殖性狀也沒差異性。平均排卵數(21.0±0.5)個，波動范圍14～27；胚胎存活率85.4%(55%～100%)；著床后的胚胎存活率96.7%(77%～100%)；平均子宮密度（單位長度子宮角的活胚胎數）為（4.7±1.1）個/m；活胚胎可利用空間為21.3 cm/個，黃體可利用空間18.6 cm/個。結果表明，高產母豬妊娠第1周飼糧營養水平高低對以上指標沒有影響，差異不顯著。 
從表2可以看出，胚胎的平均重量為(0.88±0.17)g，平均長度為(20.6±1.1)mm；每窩胚胎重量和長度的平均變異系數分別為11%和5%；兩組間的這些指標都沒有差異性。幾乎一半的母豬(高營養水平組：6/13，對照組：6/15，P>0.10)都會出現1個弱胚胎。是否出現弱胚胎的母豬無論是在排卵率，活胚胎數還是子宮密度，都沒有差異性(P>0.10)。 2.2繁殖參數之間的關系 對2個處理組間的相互關系進行了統計分析，發現營養水平對胚胎性狀沒有顯著影響，從表3可以看出，總體或著床后的胚胎存活率與排卵率或子宮長度沒有顯著的相關性，與母豬不同的年齡階段體重(斷奶時，150日齡或烯丙孕素結束時，表3數據未顯示)和其他胚胎性狀平均值都沒有顯著的相關性。妊娠27 d活胚胎數與排卵率正相關，與胚胎重量和大小無關。平均胚胎重與妊娠時間顯著相關(r=0.67,P<0.001)，平均胚胎長度與子宮長度負相關，與子宮密度正相關。胚胎重量或長度的變異系數與排卵率，總胚胎數，子宮密度和胚胎存活率不存在顯著相關性。 3、討論 人工授精后第1周飼糧營養水平對高產母豬妊娠30 d胚胎存活率沒有影響。一般交配后高營養水平對胚胎存活率的不利影響可能由于循環中孕激素濃度的降低所導致(DenHartog和v a n K e m p e n,1 9 8 0;D y c k和Strain,1983;Jindal等,1996;De等,2009)。 首先，營養水平導致肝血循環速度發生變化，從而改變豬代謝過程中孕酮的清除速度(Prime和Symonds,1993;Mille等，1999)，交配后補充孕激素可以提高早期胚胎存活率(Ashworth,1991;Jindal等,1997)。和低營養水平飼糧比較，妊娠早期高營養水平降低了孕酮濃度，母豬胚胎存活率隨之下降(Jindal等,1997;Virolainen等,2005)。然而，也有報導稱交配后飼糧營養水平影響了循環中孕酮水平，胚胎存活率不受影響(Dyck和Kennedy,1995;Ashworth等,1995)。本實驗妊娠早期未進行采血以避免產生過多的應激，因此，飼糧營養水平對高產母豬孕酮的影響仍是未知數。就胚胎重量和長度來說，飼糧營養水平(采食量和能量水平)對妊娠早期(9～12 d)母豬胚胎生長及胚胎大小和存活率變異系數沒有影響(Ashworth等,1999;Cassar等,1994)。據推測高營養水平通過影響母豬妊娠早期的胚胎存活率，可能進一步影響胚胎發育的變異系數。當營養水平不影響高產母豬胚胎存活率時，胚胎發育的變異系數差異性也體現不出來。 
不考慮營養因素，妊娠27 d胚胎存活率與排卵率和子宮角長度也無關，這與以往的研究結果是一致的。妊娠25～30 d母豬子宮容量大小并不是產仔數的限制因素(Fento等,1970)；而排卵超過20～22個例外(Blasco等,1996)。Patterson等(2008)指出，對經產母豬來說，排卵率和妊娠27 d胚胎存活率呈負相關。一方面，由于這些母豬平均排卵率高(>22)，接近1/3的母豬排卵超過25個；另一方面，Chen和Dziuk(1993)研究發現當子宮可利用空間小于25 cm/CL時，胚胎存活率則受子宮容量大小的影響。雖然本實驗高產母豬也出現早期子宮擁擠現象，但胚胎存活率與子宮可利用空間沒有相關性。 考慮到本實驗都是青年高產母豬，其排卵率高，胚胎存活率能達到85%非常不錯了。經產2胎或3胎的母豬平均排卵數為21個，平均胚胎存活率為75%(Patterson等,2008)。Østrup等(2009)調查顯示LR×LW高產母豬平均胚胎存活率可達到82%。本實驗在妊娠27d后很少發現死胚胎，而子宮著床定植的過程只需要12～25 d(Johnson等,2009)，說明妊娠的第1個月大多數胚胎死亡率在著床之前或開始之時發生。由于高的早期胚胎存活率，第27天屠宰時平均活胚胎數達17.5個；但著床穩定完成一般35 d(Chen和Dziuk,1993;Vonnahme,2002)或45～50 d(Foxcroft等,2006)完成，所以并不代表第27天所有的活胚胎數都能存活下來。 妊娠27 d或少于35 d，總胚胎數與胚胎重量和長度無關(Knight等,1977；Patterson等,2008)，活胚胎數與胎盤重量成反比關系，意味著子宮擁擠對早期胚盤發育影響高于胚胎發育。高產母豬妊娠35 d后出現子宮擁擠(高產母豬妊娠27 d，窩內胚胎重量變異系數和胚胎存活率無關。盡管著床時胚胎死亡率的波動可以降低弱胎的機率，但對定植后胚胎變異系數影響不確定。此外，實驗過程中沒有發現與胚胎低死亡率有關因素，因為胚胎存活率和胚胎異質性的關系需要更大規模母豬群和可能需要觀察妊娠后期階段。Quesnel等(2008)研究發現妊娠27 d胚胎重量的變異系數為11%，出生時為21%，說明在胚胎發育的過程中胚胎異質性提高了1倍。最后，研究結果還顯示妊娠27 d就可以檢測出弱胚胎，與vander Lende等(1990)和Ferguson等(2006)研究結果一致。弱胚胎與排卵率和胚胎可用空間之間并沒有關系，而早期發育遲緩更可能是由于卵母細胞質量受損，而不是妊娠早期子宮擁擠。 4、結論 妊娠早期飼糧高營養水平沒有降低高產母豬27d胚胎成活率，對胚胎大小和變異系數也不存在利弊性。不考慮營養因素，如果高產母豬出現高的胚胎存活率可能導致胚胎擁擠，對胚盤和胚胎后期階段的發育帶來不利影響。 |
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